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演艺经历周秀娜10岁时随家人到香港定居。在中五毕业后，周秀娜在铜锣湾金百利商场做商店营业经理。周秀娜开始进军电影、歌唱、广告和舞台界，并于2009年7月推出写真集。[1] 

2011年，参演电影《热浪球爱战》，周秀娜有意凭借此片进军内地市场。[2]  远赴上海昆山拍摄电视剧《唐朝浪漫英雄传》，由方力申、周秀娜领衔主演，是周秀娜第一次拍剧，进军内地电视市场。周秀娜更反串扮演男装，也是她首次以古装亮相电视剧。[3]  参演爱情动作喜剧电影《杀手欧阳盆栽》，和萧敬腾、曾志伟、赵正平等演员合作并一起担任主演。[4] 

2011年，周秀娜主演电影《婚前试爱》，在片中周秀娜与罗仲谦扮演了一对即将走入婚姻殿堂的年轻男女，但就在结婚前三天，两人分别遭遇了沈志明和杨梓瑶扮演的婚外情对象。[5] 

2012年5月，周秀娜出演电影《地下18层》，周秀娜

 在《地下18层》里首次扮演妈妈角色。[6] 6月，由罗德明执导，林家栋、周秀娜、曾国珲等主演的电影《纸月亮》（PAPER MOON），受邀参展第15届上海电影节。[7]  周秀娜在《夜店诡谈》在片中一人分饰多角。[8]  7月，周秀娜、汪东城主演电影《我的美丽王国》开拍，片中周秀娜饰演模特若童。[9]  在七夕专属爱情喜剧大片《HOLD住爱》中饰演方檬。[10]  同年，参演中国国内首款吸血鬼题材微电影《猎音师》和由苏州福纳影视出品的电视剧《叶问》。[9] 2013年1月，周秀娜、蓝正龙等主演的惊悚电影《电梯惊魂》，周

《唐朝浪漫英雄》剧照 (8张)

 秀娜为该片粤语版配音并谢绝导演为她找替身。[3]  2月，参演电影《在一起》，周秀娜首次和甄子丹合作出演大银幕作品。[2]  参演电影《爆3俏娇娃》，片中和内地男艺人顾又铭合作。[7]  在电影《西游降魔篇》中饰演驱魔人。[6]  并加盟AEG新亚洲娱乐，成为张柏芝师妹。[1] 

2013年，周秀娜参演电影《非狐外传》，既演狐仙，又要演仙儿。[4]  在乐视网自制网络剧《XGirl》中周秀娜饰演“人体测谎机”孙小美一角。[5]  在《冷瞳》中担纲女主角。[11] 演青春爱情冒险电影《致命闪玩》，周秀娜在《致命闪玩》中饰演的是方力申的前女友。[1] 9月，周秀娜参演现代都市情感题材电影《我想结婚的时候你在哪》，周秀娜在片中饰演“苏菲”。同时，一直关注慈善事业的周秀娜还在发布会上获颁“最美心灵艺术家奖”。[12] 

2016年，主演闺蜜喜剧《霹雳囧花》，2月26日在内地公映[13]  。